Después de sacar el tubo de congelación, se debe colocar inmediatamente en un tanque de agua a 37 grados para que se descongele rápidamente. Agite suavemente el tubo de congelación para derretirlo por completo en 1 minuto. Tenga cuidado de que la superficie del agua no exceda el borde de la cubierta del tubo de congelación, de lo contrario, se puede producir contaminación fácilmente. Además, al sacar el tubo congelado del barril de nitrógeno líquido y descongelarlo, debe prestar atención a la seguridad para evitar que el tubo congelado explote.
Nota: Use guantes durante la operación para evitar la congelación; use gafas protectoras para evitar la explosión del nitrógeno líquido del tubo recién sacado del tanque de nitrógeno líquido...
El proceso de recuperación debe ser rápido para evitar que los pequeños cristales de hielo formen cristales de hielo grandes, es decir, la recristalización de los cristales de hielo. Después de sacar las células criopreservadas del nitrógeno líquido, colóquelas inmediatamente en un baño de agua a 37 grados y agite suavemente el tubo de congelación para permitir que se derritan por completo en 1 minuto (no más de 3 minutos). Las células descongeladas se pueden inocular directamente en frascos de cultivo celular que contienen medio de cultivo completo para cultivo directo. Después de 24 horas, el medio de cultivo antiguo se puede reemplazar con medio de cultivo completo nuevo para eliminar el DMSO. Si las células son particularmente sensibles a los crioprotectores, las células descongeladas se deben centrifugar para eliminar el crioprotector antes de la inoculación en frascos de cultivo que contienen medio de crecimiento completo.